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ELISA检测试剂盒样本收集和保存方法大全
点击次数:615 发布时间:2017-02-21
   上海百蕊的ELISA检测试剂盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体,适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。

  ELISA检测的目的是为实验提供准确可靠定量分析实验的依据。为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。以下是小编整理的ELISA检测试剂盒常见的几种样本收集处理方法:

  1、细胞培养上清。细胞培养液在2500rpm/min 离心20分钟后,收集上清即刻检测, 或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

  2、血浆样本。EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集 30分钟内离心收集样本。即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

  3、血清样本。分离管分离血清。在 1000 g 离心之前,使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

  注意:不要使用严重溶血或高血脂的样本。所有样本收集后,应及时分装并贮存于-20℃。如果在 24 小时内检测,样本可以存放在 2 - 8℃。避免样本的反复冻融。在分析前,冷冻样本应该缓慢的恢复至室温,轻柔地混匀。检测前,样本中可见的沉淀必须去除。

  其中,血清是zui常见的检测标本之一,我司技术员对ELISA检测试剂盒血清标本的保存有以下几点建议:

  (1)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

  (2)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,ELISA如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。

  (3)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。

  (4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。

  (5)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。

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